【技术视频】细胞转染

2021-12-28 09:57:40 管理员 319

细胞转染实验步骤:


1、转染实验试剂展示:Opti-MEM培养基,miRNA,Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent;

2、取出6孔培养板;

3、提前做好标记;

4、每孔加入2mL培养基;

5、调整细胞浓度,每孔加入5×10^5 个细胞;

6、混匀细胞;

7、将6孔板放入培养箱,过夜培养,使细胞贴壁;

8、取出3个1.5mL EP管,做好标记,2个miRNA管,1个Lip2000管;

9、其中2个miRNA管每管加入250μL Opti-MEM培养基;

10、Lip2000管加入500μL Opti-MEM培养基;

11、Lip2000管加入10μL Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent,轻轻吹吸混匀;

12、miRNA管每管加入5μL(100pmol)miRNA,轻轻吹吸混匀;

13、室温下静置 5 min;

14、将Lip2000管液体按照每管255μL缓缓加入miRNA管,轻轻吹吸混匀;

15、室温静置20min;

16、取出培养板,吸除培养基;

17、每孔加入1.5mL新鲜培养基;

18、将510µL复合物加入对应孔中;

19、轻轻晃动6孔板;

20、将6孔板放入培养箱;

21、培养4h后取出培养板;

22、吸除培养基;

23、每孔加入2mL新鲜培养基;

24、将6孔板放入培养箱,培养24h-72h后进行后续检测。


细胞转染(1)



细胞转染(2)


细胞转染(3)


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