【技术视频】细胞划痕实验

实验步骤：

1.取出六孔板

2.将六孔板做好标记

3.用marker笔在6孔板背后

4.大约间隔0.5~1cm，每孔做5个标记

5.用直尺比着，均匀的划横线

6.横穿过孔，每孔至少穿过5条线

7.每孔加入2mL培养基

8.每孔加入约5×10⁵个细胞

9.具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满

10.将培养板放入培养箱过夜培养

11.取出培养板

12.显微镜下观察细胞密度为100%即可进行划痕检测

13.将培养板放入操作台

14.用移液器取1mL枪头套一个200μL枪头

15.取下枪头，比着培养板盖子，尽量垂至于背后的横线划痕

16.枪头要垂直，不能倾斜，注意不要碰到盖子

17.动作要快速，果断，不宜过重或过轻

18.去除培养基

19.用PBS清洗去除划下的细胞

20.加入含不同药物的无血清培养基继续培养

21.在0h、48h分别拍照，拍照时选取记号笔画的线和细胞划痕的交点作为观察点，以定点观察。

细胞划痕实验（1）

细胞划痕实验（2）