【技术视频】细胞划痕实验
2022-03-14 13:47:56
管理员
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实验步骤:
1.取出六孔板
2.将六孔板做好标记
3.用marker笔在6孔板背后
4.大约间隔0.5~1cm,每孔做5个标记
5.用直尺比着,均匀的划横线
6.横穿过孔,每孔至少穿过5条线
7.每孔加入2mL培养基
8.每孔加入约5×105个细胞
9.具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满
10.将培养板放入培养箱过夜培养
11.取出培养板
12.显微镜下观察细胞密度为100%即可进行划痕检测
13.将培养板放入操作台
14.用移液器取1mL枪头套一个200μL枪头
15.取下枪头,比着培养板盖子,尽量垂至于背后的横线划痕
16.枪头要垂直,不能倾斜,注意不要碰到盖子
17.动作要快速,果断,不宜过重或过轻
18.去除培养基
19.用PBS清洗去除划下的细胞
20.加入含不同药物的无血清培养基继续培养
21.在0h、48h分别拍照,拍照时选取记号笔画的线和细胞划痕的交点作为观察点,以定点观察。
细胞划痕实验(1)
细胞划痕实验(2)